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小鼠总脂肪酸(TFA)elisa试剂盒

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单价: 3660.00
品牌: BIM
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更新: 2018-03-08
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公司基本质料信息
  • 联系人杨司理(女士)     
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  • 德律风02160537722
  • 手机13262265854
  • 地域上海
  • 地址上海市闵行区闵北路88弄1-17号、18-30号第12幢168室
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本试剂盒用于体外定量检测血清、血浆、组织、细胞上清及相关液体样本中小鼠总脂肪酸TFA)的含量。

有用期:6个月

生涯条件:2-8℃

本试剂盒仅供体外研究应用,不用于临床诊断

 

实验原理

试剂盒接纳双抗体一步夹心法酶联免疫吸附实验(ELISA)。往事后包被小鼠总脂肪酸(TFA)捕捉抗体的包被微孔中,按序加入标本、尺度品、HRP标志的检测抗体,经由温育并完全洗濯。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成事实的黄色。色彩的深浅和样品中的小鼠总脂肪酸(TFA)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD 值),盘算样品浓度。

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样本处置赏罚赏罚及请求

1.  血清:全血标本请于室温放置2小时或4℃住宿后于1000g离心20分钟,取上清便可检测,或将标本放于-20℃-80℃生涯,但应防止重复冻融。
2.  血浆:可用EDTA或肝素作为抗凝剂,标本搜集后30分钟内于2 - 8°C 1000g离心20分钟,或将标本放于-20℃-80℃生涯,但应防止重复冻融。

3.  组织匀浆:用预冷的PBS (0.01M, pH=7.4)冲刷组织,去除残留血液(匀浆中裂解的红细胞会影响丈量效果),称重后将组织剪碎。将剪碎的组织与对应体积的PBS(浅易按1:9的重量体积比,好比1g的组织样品对应9mLPBS,详细体积可凭证实验须要适当调剂,并做好纪录。推荐在PBS中加入卵白酶榨取剂)加入玻璃匀浆器中,于冰上充实研磨。为了进一步裂解组织细胞,可以对匀浆液阻拦超声破碎,或重复冻融。最后将匀浆液于5000×g离心5~10分钟,取上清检测。

4.  细胞作育物上清或其它生物标本1000g离心20分钟,取上清便可检测,或将标本放于-20℃-80℃生涯,但应防止重复冻融。
注:标本溶血会影响最后检测效果,是以溶血标本不宜阻拦此项检测。


标本处置赏罚赏罚

1.  本公司只对试剂盒自己担负,纰谬因应用该试剂盒所组成的样本消耗担负,请应用者应用前充实推敲到样本的能够应用量,预留充实的样本。

2.  实验前应意料标本含量,假定标本浓度太高,应对标本阻拦稀释,使稀释后的标本切合试剂盒的检测规模,盘算时再乘以照顾的稀释倍数。标本应用0.01mol/LPBS稀释(PH=7.0-7.2)

3.  若所检样本不网罗在诠释书所列样本当中,建议阻拦预实验验证其有用性,并注重生涯样本。

4.  应用化学裂解液制备的组织匀浆或细胞提取液能够会由于某些化学物质的引入招致ELISA实验效果误差。

5.  若样本为细胞作育上清,因该类样本滋扰因素较多,如:细胞状态、细胞数目、采样时间等,以是能够存在检测不出的情形。

6.  某些自然卵白或重组卵白,网罗原核及真核重组卵白,能够由于与本产物所应用的检测抗体及捕捉抗体不婚配,而不被检测出。

7.  建议应用新鲜样本,生涯时间太长能够会存在卵白降解或变性招致实验效果误差。

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须要而未供应的试剂和器材

1. 酶标仪(450nm

2. 高精度加样器及枪头:0.5-10uL2-20uL20-200uL200-1000uL

3. 37℃恒温箱

4. 蒸馏水或去离子水

 

试剂盒组成

称谓

96孔装备

48孔装备

备注

微孔酶标板

8×12

8×6

尺度品

0.3mL*6

0.3mL*6

样本稀释液

6mL

3mL

检测抗体-HRP

10mL

5mL

20×洗濯缓冲液

25mL

15mL

按诠释书阻拦稀释

底物A

6mL

3mL

底物B

6mL

3mL

终止液

6mL

3mL

封板膜

2

2

诠释书

1

1

自封袋

1

1

1.  尺度品浓度按序为:100050025012562.50 μg/mL

2.  经由年夜量正常标本磨练,标本的正常浓度值均在试剂盒供应的检测规模内,实验历程当中直接取50μL样本上样便可。当有部门样本值逾越最年夜尺度品浓度时,可用样本稀释液将标本阻拦适当稀释后再阻拦实验。

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重视事项

1. 严酷凭证划定的时间和温度阻拦温育以保证准确效果。所有试剂都必须在应用前到达室温20-25℃。应用后急速冷藏生涯试剂。

2. 洗板不准确可以招致不准确的效果。在加入底物前确保尽能够吸干孔内液体。温育历程当中不要让微孔逝世板掉落落。

3. 扫除板底残留的液体和手指印,否则影响OD值。

4. 底物显色液应呈无色或很浅的色彩,曾经变蓝的底物液不克不及应用。

5. 防止试剂和标本的交织污染以阻拦组成弱点效果。

6. 在贮存和温育时防止强光直接照射。

7. 平衡至室温后再掀开密封袋以防水滴凝集在冷板条上。

8. 任何回声试剂不克不及接触漂白溶剂或漂白溶剂所散发的强烈气体。任何漂白因素都邑破损试剂盒中回声试剂的生物活性。

9. 不克不及应用过时产物。

10. 假定能够撒播疾病,所有的样品都应治理好,凭证划定的法式模范模范处置赏罚赏罚样品和检测装配

 

试剂准备

试剂盒从冷藏情形中取出应在室温平衡前方可应用。

20×洗濯缓冲液的稀释:蒸馏水按120稀释,即120×洗濯缓冲液加19份蒸馏水。

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操作法式模范

1.  从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条,残剩板条用自封袋密封放回4℃

2.  设置尺度品孔和样本孔,尺度品孔各加不合浓度的尺度品50μL

3.  样本孔待测样本50μL;空缺孔不加。

4.  除空缺孔外,尺度品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶(HRP)标志的检测抗体100μL,用封板膜封住回声孔,37℃水浴锅或恒温箱温育60min

5.  弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗濯液350μL),静置1min,甩去洗濯液,吸水纸上拍干,云云重复洗板5次(也可用洗板机洗板)。

6.  每孔加入底物AB50μL37℃避光孵育15min

7.  每孔加入终止液50μL15min内,在450nm波优点测定各孔的OD值。

 

实验效果盘算

所测尺度品的OD为横坐标,尺度品的浓度值为纵坐标,在坐标纸上或用相关软件绘制尺度曲线,并取得直线回归方程将样品的OD值代入方程,盘算出样品浓度

 

试剂盒性能

1.  检测规模31.25 μg/mL – 1000 μg/mL

2.  迅速度:最低检测浓度小于1.0 μg/mL

3.  特异性:不与其它可溶性结构类似物交织回声。

4.  重复性:板内变异系数小于10% 板间变异系数小于15% 

 

诠释

1.  由于现有条件及迷信手艺水平尚不克不及对所有供货商供应的所有质料阻拦周全的剖断与剖析,本产物能够存在一定的质量手艺风险。

2.  事实的实验效果与试剂的有用性、实验者的相关操作和其时的实验情形亲近相关,请务必准备充实的标本备份。

3.  不合批次的统一产物能够会有大批差异,如:检测限、迅速度和显色时间等,请凭证试剂盒内诠释书阻拦实验操作,网站电子版诠释书仅作参考。

4.  只需所有应用本试剂盒配套试剂才干保证检测效果,不克不及混用其他制造商的产物。只需严酷遵守本试剂盒的实验诠释才会取得最好的检测效果。

急速28  更多明确;小鼠ELISA试剂盒http://www.elisa668.com/jmswkj-SonList-148055/

BIM试剂盒www.systemsbim.com


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